ГлавнаяИнтернет-ресурсыРусскийАнглийский

Home 
Биология опухолей 
Раковые стволовые клетки 
Опухолевый ангиогенез 
Опухоли кожи 
Рак молочной железы 
Опухоли головного мозга 
Рак легких 
Рак желудка 
Опухоли печени 
Опухоли поджелудочной железы 
Рак простаты 
Саркомы 
Противоопухолевое лечение 
Раковые осложнения 
Web-ресурсы 

ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПРЕДПОЛАГАЕМЫХ РСК

Идентификация раковых стволовых клеток обычно основана на отличительной экспрессии клеточно-поверхностных антигенов (маркеров), посредством которых субпопуляции с вариабельной способностью для длительного выживания могут быть обнаружены и выделены с использованием моноклональных антител. Такие антитела направлены против орган-специфических или/и  линия дифференцирования-специфических антигенов или так называемых «маркеров стволовых клеток», и могут использоваться для обогащения (сепарации) стволовых клеток путем флюоресценция-активируемого клеточного сортинга (FACS) из образцов первичных клеток. Далее различные субпопуляции раковых клеток (предполагаемые стволовые клетки и более зрелые клетки) далее исследуются на предмет их способности репопулировать иммунодефицитные мыши с опухолью/лейкозом (функция стволовых клеток). Фактически, РСК должны  быть способны воспроизводить "первоначальный" рак или лейкоз (все или большинство компонентов болезни) в модели ксенотрансплантации (также и во вторичной реципиентной мыши). В изучений используются нестрадающие ожирением диабетические мыши с тяжелым комбинированным иммунодефицитом (NOD/SCID). Однако, в зависимости от типа опухоли, другие мышиные системы могут обеспечить даже лучшее приживление трансплантата. Несмотря на ограничения (нечеловеческая микросреда, медленно растущие опухоли могут не воспроизводится во время жизни мыши), иммунодефицитные мышиные модели остаются широко используемым подходом и считаются лучшей доступной стандартной моделью для идентификации рак- и лейкемия-инициирующих клеток в первичных тканевых образцах. В зависимости от типа опухоли первичные неопластические клетки инъецируются внутривенно (лейкозы, метастатические карциномы), подкожно (опухоли кожи, солидные опухоли), или непосредственно в солидные органы. В случае лейкозов, NOD/SCID мыши обычно облучаются сублетально для обеспечения приживления трансплантатных лейкемических клеток в костномозговых полостях мыши. Сохраняется неразрешенный вопрос - какие цитокины и какие клетки человеческой микросреды облегчают оптимальное приживление трансплантата и рост/выживание неопластических клеток в различных моделях болезни.

После инъекции, рост опухолевых/лейкемических клеток контролируется через несколько недель. После развития опухоли или лейкоза, мышь умертвляется и неоплазма исследуется гистологически и молекулярно. Ключевые вопросы в каждом эксперименте - имеет ли хенотрансплантированная опухоль действительно сходство с первоначальной неоплазмой и выявляются ли в хенотрансплантированной опухоли большинство или все элементы (субклоны) первоначальной неоплазмы. Далее документируют длительное приживление трансплантата и, таким образом, подтверждают стволово-клеточную функцию у РСК в хенотрансплантированных опухолях. Из последних РСК могут быть восстановлены и трансплантированы во вторичную реципиентную мышь, где они должны снова формировать опухоли, все компоненты первичной опухоли/лейкоза и новый РСК пул. В каждом проекте важно продемонстрировать, что более зрелые клетки неспособны репопулировать лейкозы/опухоли у той же самой мыши. Это трудно продемонстрировать в медленно растущих/развивающихся неоплазмах, поскольку время развития человеческой неоплазмы может превышать продолжительность жизни мыши. Кроме того, в таких неоплазмах иногда трудно провести различие между приживлением "реальных" трансплантированных РСК и персистированием более зрелых прогениторов, которые имеют только ограниченную способность к делению. Поэтому, в таких неоплазмах (например, хронические лейкозы) особо важно подтвердить приживление трансплантата и рост неопластических клеток во вторичной реципиентной мыши в порядке рассмотрения показывают или теряют эти клетки функцию стволовых клеток. Другой важный вопрос - происходят ли пересаженные клетки действительно из неопластических стволовых клеток (РСК) или из нормальных стволовых клеток.

 

Ссылки:

     

 

Link

comments powered by Disqus

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Cтволовые клетки 
Асиметричное деление стволовых клеток 
Сигнальные пути раковых СК 
Идентификация предполагаемых РСК 
Клеточно-поверхностные маркеры РСК 
In vitro анализ РСК 
Меланомные стволовые клетки 
РСК кишечника 
Метастазирование РСК 
Резистентность РСК 
Таргетинг раковых стволовых клеток 
WNT сигналинг 
Musashi 
Hedgehog сигналинг 
Notch сигналинг 

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 


Copyright (c) 2020 Konstantin Korchagin. All rights reserved.

k-korchagin@mail.ru